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涂抹、落菌、水質微生物取樣檢測檢驗規(guī)范

發(fā)布時間:2023-07-07    瀏覽次數(shù):718

檢測點 檢驗項目 技術要求 檢驗方法 采樣方法 檢測頻率 判定方案
工器具、案板等接觸面(生產現(xiàn)場)菌落總數(shù)≤5000個/25cm2(生)梯度稀釋,傾注接種營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基,36±1℃,48h后計數(shù),報告用浸有滅菌生理鹽水的棉簽在被檢物體表面,取25cm2的面積,在其內涂抹10次,然后剪去手接觸部分棉棒,將棉簽放入含10mL滅菌生理鹽水的采樣管內送檢1次/周/車間一項不合格判為不合格品。不合格品按《不合格品控制程序》執(zhí)行
≤2500個/25cm2(熟)
大腸菌群≤30MPN/25cm2(生)試管法:梯度稀釋,三個稀釋度接種LST肉湯培養(yǎng)基各三管,36±1℃,48h后記錄產氣管數(shù),然后復發(fā)酵,記錄產氣管數(shù),查MPN表報告
陰性(熟)
員工手(生產現(xiàn)場)菌落總數(shù)≤5000個/手(生)梯度稀釋,傾注接種營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基,36±1℃,48h后計數(shù),報告被檢人五指并攏,用浸濕生理鹽水的棉簽在右手指曲面,從指尖到指端來回涂擦10次,然后剪去手接觸部分棉棒,將棉簽放入含10mL滅菌生理鹽水的采樣管內送檢1次/周/車間
≤2500個/手(熟)
大腸菌群≤90MPN/手(生)試管法:梯度稀釋,三個稀釋度接種LST肉湯培養(yǎng)基各三管,36±1℃,48h后記錄產氣管數(shù),然后復發(fā)酵,記錄產氣管數(shù),查MPN表報告
陰性(熟)
空氣車間(菌落總數(shù))≤30個/皿平板暴露法:車間在30m2以上者,于東、西、南、北(距墻1m處)、中五點;小于30m2者,于一條對角線里、中、外三點,高度均在1.5m處采樣,打開平皿蓋,使平板在空氣中暴露30 min取樣后的瓊脂培養(yǎng)基于37℃溫箱培養(yǎng)48h后觀察結果,求出5個或3個采樣點的平均菌數(shù)2次/月/車間 
更衣室(菌落總數(shù))≤40個/皿
生產用水菌落總數(shù)≤100CFU/mL梯度稀釋,傾注接種營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基,36±1℃,48h后計數(shù),報告對待取樣的水龍頭進行消毒,并打開水龍頭數(shù)分鐘,用經過滅菌的玻璃采樣瓶去水樣0.5L后及時送檢,采樣后按照每125mL水樣加入0.1mg硫代硫酸鈉除去殘留余氯。1次/月,全年檢測完所有水龍頭 
大腸菌群不得檢出

多管發(fā)酵法:

1、乳糖發(fā)酵試驗:接種5份10mL水樣雙料培養(yǎng)基,每份接種10mL水樣,將接種管置36℃±1℃培養(yǎng)箱內,培養(yǎng)24h±2h,如所有乳糖蛋白膝培養(yǎng)管都不產氣產酸,則可報告為總大腸菌群陰性,如有產酸產氣者,則按下列步驟進行。

2、分離培養(yǎng):將產酸產氣的發(fā)酵管分別轉種在伊紅美藍瓊脂平板上,于36℃±1℃ 培養(yǎng)箱內培養(yǎng)18h—24h,觀察菌落形態(tài),挑取符合下列特征的菌落作革蘭氏染色、鏡檢和證實試驗。

3、證實試驗:經上述染色鏡檢為革蘭氏陰性無芽抱桿菌,同時接種乳糖蛋白胨培養(yǎng)液,置36℃±1℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24h±2h,有產酸產氣者,即證實有總大腸菌群存在。

4、結果報告:查MPN ( most Probable number,最可能數(shù))檢索表,報告每100mL水樣中的總大腸菌群最可能數(shù)(MPN)值。稀釋樣品查表后所得結果應乘稀釋倍數(shù)。如所有乳糖發(fā)酵管均陰性時,可報告總大腸菌群未檢出。

文件版:涂抹、落菌、水質微生物取樣檢測檢驗規(guī)范.xls

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