假單胞菌的常規(guī)檢測(cè)分離
發(fā)布時(shí)間：2024-07-19 瀏覽次數(shù)：573
假單胞菌（Pseudomonas）是潮濕環(huán)境的典型居民，在化妝品、游泳池、熱水浴缸和鞋的內(nèi)底中都有發(fā)現(xiàn)，導(dǎo)致毛囊炎、外耳炎和糖尿病足感染。大多數(shù)假單胞菌屬需氧、過(guò)氧化氫酶陽(yáng)性、氧化酶陽(yáng)性、革蘭氏陰性桿菌（aerobic, catalase-positive, oxidase-positive, gram-negative bacilli）。它們的代謝主要是呼吸性的，以氧為終端電子受體，很少發(fā)酵，利用精氨酸進(jìn)行厭氧生長(zhǎng)。許多假單胞菌是通過(guò)極性鞭毛運(yùn)動(dòng)的（polar flagella）。
如今，雖然銅綠假單胞菌（Pseudomonas aeruginosa）引起最大的發(fā)病率和死亡率，其他假單胞菌，雖然經(jīng)常從臨床標(biāo)本分離，只是偶爾參與引發(fā)疾病。銅綠假單胞菌在醫(yī)院環(huán)境中無(wú)處不在，幾乎存在于任何有水分的地方，包括醫(yī)療設(shè)備、消毒溶液和肥皂。它很少作為健康人正常菌群的一部分被發(fā)現(xiàn)，但在住院患者中，定植率隨著住院時(shí)間的延長(zhǎng)而增加。銅綠假單胞菌可在燒傷、創(chuàng)傷和手術(shù)傷口患者中被發(fā)現(xiàn)，在尿路操作后，在造血系統(tǒng)、網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)和淋巴系統(tǒng)疾病患者以及細(xì)胞或體液防御受損的患者中產(chǎn)生嚴(yán)重的感染。肺部感染常見(jiàn)于囊性纖維化(cystic fibrosis, CF)患者或機(jī)械通氣（mechanical ventilation）患者。嚴(yán)重白細(xì)胞減少患者的死亡率最高。銅綠假單胞菌產(chǎn)生粘液多糖、內(nèi)毒素和蛋白質(zhì)酶，這些酶使補(bǔ)體成分失活，從而在一定程度上抑制調(diào)節(jié)和炎癥反應(yīng)（opsonization and the inflammatory response），并可能有助于其侵襲性。外毒素A（Exotoxin A）促進(jìn)細(xì)胞損傷和組織侵襲，并對(duì)巨噬細(xì)胞有毒性。
培養(yǎng)中的銅綠假單胞菌的實(shí)驗(yàn)室診斷常常是可疑的，因?yàn)樗衅咸褷罨蛴衩追鄣臍馕?，其菌落在羊血瓊脂上的粗糙或磨玻璃外觀，并且存在兩種色素中的一種或兩種:一種藍(lán)綠色熒光色素或由pyoverdin色素引起的金屬光澤。通過(guò)氧化酶反應(yīng)陽(yáng)性，在42°C下生長(zhǎng)，在TSI瓊脂中進(jìn)行堿性斜/中性對(duì)接反應(yīng)，以及在TSI和假單胞菌P瓊脂的斜面上形成光澤或色素，可以很容易地識(shí)別出它。碳水化合物利用試驗(yàn)應(yīng)在O-F基礎(chǔ)培養(yǎng)基中進(jìn)行，其中含有少量的蛋白胨和相對(duì)大量的碳水化合物，因此，它可以檢測(cè)到由這組細(xì)菌形成的非常少量的酸。反應(yīng)通常在48小時(shí)內(nèi)完成，但也可能需要長(zhǎng)達(dá)7天的時(shí)間。與傳統(tǒng)鑒定方法相比，由于縮短了周轉(zhuǎn)時(shí)間和降低了費(fèi)用，MALDI-TOF現(xiàn)在通常用于銅綠假單胞菌的鑒定。應(yīng)對(duì)所有具有臨床意義的銅綠假單胞菌進(jìn)行藥敏試驗(yàn)。銅綠假單胞菌感染和藥敏試驗(yàn)應(yīng)常規(guī)進(jìn)行以下藥物:β-內(nèi)酰胺聯(lián)合藥物如哌拉西林-他唑巴坦（piperacillin-tazobactam）、頭孢他啶-阿維巴坦（ceftazidime-avibactam）和頭孢甲苯-他唑巴坦（ceftolozane-tazobactam）、頭孢他啶（ceftazidime）、頭孢吡肟（cefepime）、氨曲南（aztreonam）、碳青霉烯類(lèi)藥物（carbapenems）、氨基類(lèi)苷類(lèi)藥物（aminoglycosides）和氟喹諾酮類(lèi)藥物（fluoroquinolones）。銅綠假單胞菌對(duì)阿莫西林-克拉維酸鹽（amoxicillin-clavulanate）、頭孢曲松（ceftriaxone）、TMP-SMX和四環(huán)素（tetracyclines）以及較新的廣譜抗生素厄他培南和替加環(huán)素（newer broad-spectrum antibiotics ertapenem and tigecycline）具有內(nèi)在耐藥性。銅綠假單胞菌的醫(yī)院菌株可能對(duì)許多種類(lèi)的抗生素具有耐藥性，并且多重耐藥銅綠假單胞菌的發(fā)病率正在增加，特別是在重癥監(jiān)護(hù)病房和長(zhǎng)期患有假單胞菌感染的患者中，例如患有CF和其他慢性綜合征的患者。當(dāng)遇到耐藥分離株時(shí)，通常對(duì)粘菌素和多粘菌素B（polymyxin B）進(jìn)行額外的藥敏試驗(yàn)。
Figure 1. Gram stain of Pseudomonas aeruginosa （Derived from McPherson, R. A., & Pincus, M. R. 2021）
參考文獻(xiàn)：McPherson, R. A., & Pincus, M. R. (2021). Henry's clinical diagnosis and management by laboratory methods E-book. Elsevier Health Sciences.
來(lái)源：微生物安全與健康網(wǎng)
鏈接：https://www.mbiosh.com/column/testing-technology/testing-technology-method/27606
