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假單胞菌的常規(guī)檢測(cè)分離

發(fā)布時(shí)間:2024-07-19    瀏覽次數(shù):578

假單胞菌(Pseudomonas)是潮濕環(huán)境的典型居民,在化妝品、游泳池、熱水浴缸和鞋的內(nèi)底中都有發(fā)現(xiàn),導(dǎo)致毛囊炎、外耳炎和糖尿病足感染。大多數(shù)假單胞菌屬需氧、過氧化氫酶陽(yáng)性、氧化酶陽(yáng)性、革蘭氏陰性桿菌(aerobic, catalase-positive, oxidase-positive, gram-negative bacilli)。它們的代謝主要是呼吸性的,以氧為終端電子受體,很少發(fā)酵,利用精氨酸進(jìn)行厭氧生長(zhǎng)。許多假單胞菌是通過極性鞭毛運(yùn)動(dòng)的(polar flagella)。

如今,雖然銅綠假單胞菌(Pseudomonas aeruginosa)引起最大的發(fā)病率和死亡率,其他假單胞菌,雖然經(jīng)常從臨床標(biāo)本分離,只是偶爾參與引發(fā)疾病。銅綠假單胞菌在醫(yī)院環(huán)境中無處不在,幾乎存在于任何有水分的地方,包括醫(yī)療設(shè)備、消毒溶液和肥皂。它很少作為健康人正常菌群的一部分被發(fā)現(xiàn),但在住院患者中,定植率隨著住院時(shí)間的延長(zhǎng)而增加。銅綠假單胞菌可在燒傷、創(chuàng)傷和手術(shù)傷口患者中被發(fā)現(xiàn),在尿路操作后,在造血系統(tǒng)、網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)和淋巴系統(tǒng)疾病患者以及細(xì)胞或體液防御受損的患者中產(chǎn)生嚴(yán)重的感染。肺部感染常見于囊性纖維化(cystic fibrosis, CF)患者或機(jī)械通氣(mechanical ventilation)患者。嚴(yán)重白細(xì)胞減少患者的死亡率最高。銅綠假單胞菌產(chǎn)生粘液多糖、內(nèi)毒素和蛋白質(zhì)酶,這些酶使補(bǔ)體成分失活,從而在一定程度上抑制調(diào)節(jié)和炎癥反應(yīng)(opsonization and the inflammatory response),并可能有助于其侵襲性。外毒素A(Exotoxin A)促進(jìn)細(xì)胞損傷和組織侵襲,并對(duì)巨噬細(xì)胞有毒性。

培養(yǎng)中的銅綠假單胞菌的實(shí)驗(yàn)室診斷常常是可疑的,因?yàn)樗衅咸褷罨蛴衩追鄣臍馕?,其菌落在羊血瓊脂上的粗糙或磨玻璃外觀,并且存在兩種色素中的一種或兩種:一種藍(lán)綠色熒光色素或由pyoverdin色素引起的金屬光澤。通過氧化酶反應(yīng)陽(yáng)性,在42°C下生長(zhǎng),在TSI瓊脂中進(jìn)行堿性斜/中性對(duì)接反應(yīng),以及在TSI和假單胞菌P瓊脂的斜面上形成光澤或色素,可以很容易地識(shí)別出它。碳水化合物利用試驗(yàn)應(yīng)在O-F基礎(chǔ)培養(yǎng)基中進(jìn)行,其中含有少量的蛋白胨和相對(duì)大量的碳水化合物,因此,它可以檢測(cè)到由這組細(xì)菌形成的非常少量的酸。反應(yīng)通常在48小時(shí)內(nèi)完成,但也可能需要長(zhǎng)達(dá)7天的時(shí)間。與傳統(tǒng)鑒定方法相比,由于縮短了周轉(zhuǎn)時(shí)間和降低了費(fèi)用,MALDI-TOF現(xiàn)在通常用于銅綠假單胞菌的鑒定。應(yīng)對(duì)所有具有臨床意義的銅綠假單胞菌進(jìn)行藥敏試驗(yàn)。銅綠假單胞菌感染和藥敏試驗(yàn)應(yīng)常規(guī)進(jìn)行以下藥物:β-內(nèi)酰胺聯(lián)合藥物如哌拉西林-他唑巴坦(piperacillin-tazobactam)、頭孢他啶-阿維巴坦(ceftazidime-avibactam)和頭孢甲苯-他唑巴坦(ceftolozane-tazobactam)、頭孢他啶(ceftazidime)、頭孢吡肟(cefepime)、氨曲南(aztreonam)、碳青霉烯類藥物(carbapenems)、氨基類苷類藥物(aminoglycosides)和氟喹諾酮類藥物(fluoroquinolones)。銅綠假單胞菌對(duì)阿莫西林-克拉維酸鹽(amoxicillin-clavulanate)、頭孢曲松(ceftriaxone)、TMP-SMX和四環(huán)素(tetracyclines)以及較新的廣譜抗生素厄他培南和替加環(huán)素(newer broad-spectrum antibiotics ertapenem and tigecycline)具有內(nèi)在耐藥性。銅綠假單胞菌的醫(yī)院菌株可能對(duì)許多種類的抗生素具有耐藥性,并且多重耐藥銅綠假單胞菌的發(fā)病率正在增加,特別是在重癥監(jiān)護(hù)病房和長(zhǎng)期患有假單胞菌感染的患者中,例如患有CF和其他慢性綜合征的患者。當(dāng)遇到耐藥分離株時(shí),通常對(duì)粘菌素和多粘菌素B(polymyxin B)進(jìn)行額外的藥敏試驗(yàn)。

Figure 1. Gram stain of Pseudomonas aeruginosa (Derived from McPherson, R. A., & Pincus, M. R. 2021)

參考文獻(xiàn):McPherson, R. A., & Pincus, M. R. (2021). Henry's clinical diagnosis and management by laboratory methods E-book. Elsevier Health Sciences.

來源:微生物安全與健康網(wǎng)
鏈接:https://www.mbiosh.com/column/testing-technology/testing-technology-method/27606

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