食品中金黃色葡萄球菌（定量）檢測(cè)的能力驗(yàn)證
發(fā)布時(shí)間：2023-03-17 瀏覽次數(shù)：861
一、能力驗(yàn)證的目的
開(kāi)展能力驗(yàn)證試驗(yàn)是檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)能力和提高檢測(cè)水平的重要手段。利用實(shí)驗(yàn)室間的比對(duì)，對(duì)實(shí)驗(yàn)室的校準(zhǔn)或檢驗(yàn)工作進(jìn)行判定。目的是為了實(shí)現(xiàn)確定某個(gè)實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行某些特定檢測(cè)或測(cè)量能力，以及監(jiān)控實(shí)驗(yàn)室的持續(xù)能力。
二、能力驗(yàn)證步驟
1、前期做好充足的準(zhǔn)備工作，根據(jù)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)，盡可能制定一個(gè)檢驗(yàn)檢測(cè)的方案，以便保證結(jié)果的準(zhǔn)確性。
2、樣品來(lái)源：2瓶不同的真空西林瓶裝白色凍干粉末樣品
3、樣品處理
樣品儲(chǔ)存：-15℃以下冷凍保存
樣品活化步驟（建議）：-20℃~ 4℃（30min），然后室溫（30min），接著樣品再水化（盡量減少大范圍溫度變化對(duì)待測(cè)樣品的影響）。
樣品再水化：一般能力驗(yàn)證樣品以國(guó)體粉末形式發(fā)放，以液體（CFU/mL）形式出報(bào)告。樣品再水化前一定要認(rèn)真、仔細(xì)閱讀作業(yè)指導(dǎo)書(shū)，無(wú)特殊規(guī)定，本次水化后的樣品40mL為待測(cè)原液。
4、方法選擇國(guó)標(biāo)第二法
5、B-P平板計(jì)數(shù)（20 CFU ~200 CFU）
（1）1號(hào)樣品：37℃，培養(yǎng)48h
100稀釋（接種量0.3mL,0.3mL,0.4mL）
1000倍稀釋（接種量0.3mL,0.3mL,0.4mL）
（2）2號(hào)樣品：37℃，培養(yǎng)48h
10稀釋（接種量0.3mL,0.3mL,0.4mL）
100稀釋（接種量0.3mL,0.3mL,0.4mL）
平板涂布不是很好，有少部分菌落跑到了平板邊緣處，對(duì)于計(jì)數(shù)會(huì)有些影響。大家在該操作過(guò)程中涂布棒盡量不要接觸平板邊緣。
注意事項(xiàng)：
a.B-P瓊脂平板制作：盡量在試驗(yàn)前一天制作好，當(dāng)天制作平板得出的結(jié)果與之相差較大，原因可能是平板涂布時(shí)沒(méi)有完全干燥導(dǎo)致的。
b.梯度稀釋（25mL+225mL）：是關(guān)鍵步驟，必須盡可能地減少誤差（新手建議渦旋混勻，渦旋時(shí)間不宜過(guò)長(zhǎng)，長(zhǎng)時(shí)間離心力等作用下，微生物細(xì)胞可能死亡）。
c.涂布：盡可能涂布均勻，不要接觸平板邊緣，避免菌落疊在一起，而導(dǎo)致無(wú)法計(jì)數(shù)。
6、血平板（溶血觀察）
（1）1號(hào)樣品溶血情況（正反面）挑取平板5個(gè)菌落進(jìn)行試驗(yàn)（只列出前三個(gè)菌落結(jié)果）
（2）2號(hào)樣品溶血情況（正反面，只列出前三個(gè)菌落結(jié)果）
7、血漿凝固酶試驗(yàn)
（2）血漿凝固酶試驗(yàn)（凍干兔血漿：廣東環(huán)凱）
1號(hào)樣品：
2號(hào)樣品：
8、鏡檢
（1）1號(hào)樣品
（2）2號(hào)樣品
9、 能力驗(yàn)證結(jié)果
來(lái)源：“食品微生物檢測(cè)”公眾號(hào) StreamCHC
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