產品名稱：SaCas9 Nuclease
中文名稱：SaCas9 核酸酶
產品編號與包裝規(guī)格：
| 編號 | 產品名稱 | 規(guī)格 | 產品介紹 | 價格 |
| HKE372 | SaCas9 Nuclease | 50μg/盒 | crispr基因編輯（核酸酶） | 1365 |
產品描述：
CRISPR/Cas9 是細菌和古細菌在長期演化過程中形成的一種適應性免疫防御系統(tǒng)。CRISPR/Cas9 系統(tǒng)將入侵噬菌體和質粒 DNA 的片段整合到 CRISPR 序列中，并利用相應的 CRISPR RNAs（crRNAs）來指導 Cas9 蛋白對同源序列的降解，從而提高免疫性。人工改造過的 Cas9/sgRNA 系統(tǒng)通過 sgRNA（short guide RNA）引導 Cas9 蛋白 識別并剪切帶有 sgRNA 靶點的雙鏈 DNA，可用于基因敲除和精確編輯 DNA 等操作。
SaCas9 Nuclease 識別 5'-NNGRRT-3' PAM 序列，較長的 PAM序列具有更高的特異性。此外，該酶蛋白分子量相對于 SpCas9 較小，在電轉時具有更高的轉化效率。本產品提供的 Cas9 核酸內切酶通過在蛋白兩端加了核定位信號（NLS），可使蛋白進入細胞核內進行基因組編輯。
產品特點：可顯著降低脫靶效應； 純蛋白體系，避免 CRISPR 基因敲除時引入質粒或病毒干擾。
產品用途：
1，基于蛋白與 sgRNA 轉染的非病毒載體 CRISPR 基因敲除；
2，基于蛋白與 sgRNA 轉染的非病毒載體 CRISPR 基因敲入；
3，sgRNA 剪切靶點 DNA 效率檢測，降低體內篩選成本；
4，體外剪切靶 DNA 的特異位點。
應用實例：圖例）SaCas9 Nuclease 做 DNA 片段切割活性檢測：
帶有靶位點的DNA 片段為 1500bp，酶切后的片段為 1000bp 和 500bp。
保存溫度：-20℃保存，或-80℃長期保存。
SaCas9 Nuclease 產品包裝（A包裝）：
| 產品組成 | 體積 |
| SaCas9 Nuclease(1μg/μl) | 50 μL |
| 10× SaCas9 Reaction Buffer | 500μl |
保存體系：20mM HEPES，500mM KCl，0.1Mm DTT，1%Sucrose，PH7.5，25℃。
質量保證：經多次柱純化，SDS-PAGE 膠檢測僅可見清晰單一的目的條帶，純度達 95%；內毒素含量<100EU/mg；qPCR 方法檢測無大腸桿菌基因組殘留；無 RNase、核酸內、外切酶污染。
體外切割體系（20μL）：
| dsDNA | 200 ng |
| sgRNA | 200 ng |
| SaCas9 Nuclease | 0.2-1 ug |
| 10× SaCas9 Reaction Buffer | 2 μl |
| RNase Free Water | To 20 μl |
37 ℃保溫 1 h、70℃保溫 10 min
注：在反應體系中可添加 RNase Inhibitor 至 1U/μl，防止RNase 污染。
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| HKE365 | Cas9 Nuclease |
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| HKE369 | sgRNA In Vitro one-step Transcription Kit |
| HKE370 | sgRNA Screening and Genotype Confirmation Kit |
* 為 Cas9 D10A Nickase，能在與 sgRNA 靶序列互補的 DNA 鏈上產生切口，從而形成功能性的單鏈斷裂，可以減少意外的脫靶基因修飾。
** 為 Cas9 H840A Nickase，能在與 sgRNA 靶序列非互補的DNA 鏈上產生切口，從而形成功能性的單鏈斷裂，可以減少意外的脫靶基因修飾。
***為 Cas9(D10A,H840A) Nuclease，為 Cas9D10A，H840A 雙突變失活酶，具有靶 DNA 結合活性，但無切割活性，可用于陰性對照等用途。
