一種檢測(cè)面粉中VBNC鼠傷寒沙門氏菌的方法
發(fā)布時(shí)間：2024-11-18 瀏覽次數(shù)：346
面粉中的沙門氏菌引起的感染
根據(jù)美國(guó)食品藥品監(jiān)督管理局（FDA）和疾病控制與預(yù)防中心 (CDC) 的報(bào)告，在2023年，一種與面粉消費(fèi)相關(guān)的沙門氏菌爆發(fā)導(dǎo)致了全美13個(gè)州的14例感染病例。此外，從2017年至2022年，生面團(tuán)因受到沙門氏菌或大腸桿菌O157：H7污染而導(dǎo)致召回或爆發(fā)事件達(dá)22起。這些事件顛覆了面粉干燥性質(zhì)使其成為低風(fēng)險(xiǎn)成分的普遍誤解。事實(shí)證明，細(xì)菌病原體如沙門氏菌和大腸桿菌O157：H7可以在小麥粉中長(zhǎng)期存活。
檢測(cè)面粉中沙門氏菌的重要性
在面粉中檢測(cè)病原體非常復(fù)雜，特別是當(dāng)它們進(jìn)入活但非培養(yǎng)可得（VBNC）狀態(tài)時(shí)。在這種狀態(tài)下，細(xì)菌仍保持代謝活性但無法通過常規(guī)平板法檢測(cè)到，這給公共衛(wèi)生和食品安全帶來了重大風(fēng)險(xiǎn)。已知這些細(xì)菌能夠在VBNC狀態(tài)下維持其致病性，因而微生物監(jiān)測(cè)和確保食品安全的準(zhǔn)確快速檢測(cè)方法得到了人們的關(guān)注。
ddPCR和DNA嵌入染料檢測(cè)沙門氏菌
該研究[1]使用ddPCR結(jié)合DNA嵌入染料的方法，成功地檢測(cè)了沙門氏菌的invA基因，并量化了其在不同環(huán)境條件下的存活狀態(tài)。該方法不僅能夠評(píng)估細(xì)胞的活力，還能夠與傳統(tǒng)的qPCR和計(jì)數(shù)方法進(jìn)行比較，為食品加工和儲(chǔ)存中的微生物污染提供了新的見解。此外，該研究還發(fā)現(xiàn)了DNA嵌入染料的有效性和靈敏度，以及它們?cè)趨^(qū)分活細(xì)胞和死細(xì)胞方面的潛力。
圖1 ddPCR對(duì)10倍稀釋的pDNA中S.Typhimurium的invA基因進(jìn)行定量
圖2比較平板計(jì)數(shù)法和DNA-染料活細(xì)胞檢測(cè)法（包括PMA、DyeTox13、DyeTox13+EMA，以及無處理）的結(jié)果。在不同劑量的沙門氏菌濃度下，在不同的儲(chǔ)存溫度下對(duì)沙門氏菌進(jìn)行培養(yǎng)，并測(cè)試其生理狀態(tài)。（A）、（B）和（C）分別指在4℃、25℃和37℃下培養(yǎng)的面粉樣品，并通過ddPCR進(jìn)行檢測(cè)。
總結(jié)：該研究為食品加工和儲(chǔ)存中的微生物污染提供了新的見解，但仍需要進(jìn)一步的研究來確定其他細(xì)菌株在不同環(huán)境條件下的存活狀態(tài)。此外，該研究還需要更多的實(shí)驗(yàn)來驗(yàn)證其方法的可靠性和準(zhǔn)確性。然而，該研究的結(jié)果表明，ddPCR結(jié)合DNA嵌合染料的方法具有巨大的潛力，可以成為一種快速、敏感、成本效益高且易于使用的檢測(cè)食品中病原體及其VBNC狀態(tài)的方法。這將有助于降低食品安全風(fēng)險(xiǎn)并改善公共衛(wèi)生。
參考文獻(xiàn)：[1]LI L, BAE S. Quantitative detection and survival analysis of VBNC Salmonella Typhimurium in flour using droplet digital PCR and DNA-intercalating dyes [J]. Microbiology Spectrum, 2024.
來源：微生物安全與健康網(wǎng)，作者~黃玲。
