食品微生物學(xué)樣品的采集要求探討
發(fā)布時(shí)間：2023-03-03 瀏覽次數(shù)：932
來源：六扇門Study公眾號原創(chuàng)文章
樣品采集作為檢驗(yàn)的第一步★
樣品采集作為檢驗(yàn)的第一步，是獲得檢驗(yàn)數(shù)據(jù)的基礎(chǔ), 若抽樣或采樣不合理, 會(huì)導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)結(jié)果失準(zhǔn), 不能獲得有效的數(shù)據(jù)。
故在食品的衛(wèi)生監(jiān)督檢驗(yàn)中, 樣品采集起著舉足輕重的作用, 尤其是微生物樣品的采集。
檢驗(yàn)過程中的采樣、運(yùn)送、保存或制備等任何一步操作不當(dāng)均可導(dǎo)致樣品不具有代表性，直接影響實(shí)驗(yàn)室微生物檢驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性, 導(dǎo)致檢驗(yàn)工作無效。
黃啟紅等人針對食品微生物學(xué)樣品采集操作規(guī)程進(jìn)行了探討，小六匯總部分關(guān)于“采集要求”的內(nèi)容，分享給大家，希望可以為大家提供參考。
01 隨機(jī)性、代表性、真實(shí)性
樣品的采集一般應(yīng)遵循隨機(jī)性、代表性、真實(shí)性的原則。從整體中采集可代表其組成和質(zhì)量的一小部分, 通過樣本來判斷整批產(chǎn)品是否合格, 不能任意抽取一部分作為分析樣品, 必須保證物質(zhì)的代表性。
隨機(jī)性一般采用整群隨機(jī)抽樣、分層隨機(jī)抽樣、分段隨機(jī)抽樣和系統(tǒng)隨機(jī)抽樣, 有時(shí)根據(jù)檢驗(yàn)的目標(biāo), 兼顧檢樣的代表性和隨機(jī)性。
簡單隨機(jī)抽樣法, 通常情況下需將個(gè)體一一編號利用隨機(jī)號碼表或其他隨機(jī)方法, 作放回或不放回抽樣, 抽取特定號碼的個(gè)體, 因此總體容量不大時(shí), 簡單隨機(jī)抽樣是一種有效的抽樣方法。
分層隨機(jī)抽樣必須滿足總體中的任一 m 個(gè)體都必定屬于且只屬某一層, 每一層的個(gè)體數(shù)目是確切的, 在任何兩層進(jìn)行的抽樣都相互獨(dú)立, 一般當(dāng)獲得的資料分布不均或呈偏態(tài)分布時(shí), 分層抽樣是一種有效的抽樣方法; 分段隨機(jī)抽樣時(shí), 要求每個(gè)區(qū)域內(nèi)部的差異大些, 區(qū)域之間的差異要小些, 這樣的效果才會(huì)比較好。
系統(tǒng)隨機(jī)抽樣是從總體中每隔K個(gè)個(gè)體抽取一個(gè)樣本, K為抽樣比值, 比值是總?cè)萘?nbsp;N 與樣本容量 n 之比, 即 K＝N/n。當(dāng)比值 K 已知時(shí), 利用隨機(jī)數(shù)或隨機(jī)號碼確定隨機(jī)起點(diǎn), 于是, 可從總體中抽取部分個(gè)體組成樣本。
02 遵循無菌操作程序
采用過程中為防止帶入雜質(zhì)或污染, 采樣方法要盡量簡單, 處理裝置尺寸適當(dāng)。
微生物采樣過程應(yīng)嚴(yán)格遵循無菌操作程序, 采用干熱或濕熱等方法對采樣工具進(jìn)行滅菌或消毒, 處理后包裝完好以備采樣使用, 采樣用的工具不能重復(fù)使用, 防止交叉和一切有可能帶來的外界污染。
容器必須清潔、防漏、滅菌、廣口、干燥, 大小適合以方便盛放各種檢樣, 準(zhǔn)備多種款式以備不時(shí)之需。
不同樣本如何規(guī)范采樣？案例
3.1 液體樣本
??需要用到的耗材
1、無菌水樣袋
2、酒精棉
3、記號筆
4、一次性手套等
??采樣操作
1、先用記號筆在無菌袋上做好標(biāo)識(shí)。
2、采消毒雙手后，用酒精棉消毒旋蓋口（不要重復(fù)擦拭），消毒出水口，然后進(jìn)行樣本采集。
3、采集后馬上旋緊完成（采集過程中旋蓋保持在手中）。
02 固體樣本
?需要用到的耗材
1、無菌采樣袋
2、無菌鑷子、鏟子等
3、酒精棉
4、記號筆
5、一次性手套等
?采樣操作
1、用酒精棉擦拭無菌采樣袋口，進(jìn)行消毒，手拉開兩邊系帶打開無菌袋。（不可來回擦拭）。
2、使用規(guī)定的采樣工具（一次性工具或已滅菌的鑷子、鏟子等工具)取樣放入無菌袋，取到適量后密封無菌袋。
3、采樣完成后，應(yīng)立即密封采樣袋，注意手部不要碰到封邊袋口。做好相關(guān)標(biāo)識(shí)，并按照要求進(jìn)行貯存。
03 空氣采樣
??需要用到的儀器、耗材
1、含營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基的平板（直徑9 cm）
2、記號筆
3、一次性手套等
4、浮游菌采集器（浮游菌采集需要）
??采樣操作
室內(nèi)面積不超過30m２，在對角線上設(shè)里、中、外三點(diǎn)，里、外點(diǎn)位置距墻1 m；室內(nèi)面積超過30 m２，設(shè)東、西、南、北、中5點(diǎn)，周圍4點(diǎn)距墻1 m。
采樣時(shí)，將含營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基的平板（直徑9 cm）置采樣點(diǎn)（約桌面高度），打開平皿蓋，使平板在空氣中暴露5min。（浮游菌采集參照各廠家儀器操作）
??沉降菌和浮游菌采集差異
沉降菌
優(yōu)點(diǎn)是：
（1）無需特殊設(shè)備。
（2）干擾較少，采樣時(shí)間長，有利于監(jiān)控生產(chǎn)全過程。
缺點(diǎn)是：
（1）半定量，不能體現(xiàn)空氣微生物實(shí)際濃度。
（2）易受空氣微小氣候影響，要求檢驗(yàn)者操作規(guī)范。
（3）不適用于高潔凈度區(qū)域。
浮游菌
優(yōu)點(diǎn)是：捕獲效率更高，可定量監(jiān)測空氣微生物濃度，結(jié)果更被承認(rèn)。
缺點(diǎn)是：
（1）測試時(shí)間較短，僅反映采樣當(dāng)時(shí)的空氣微生物污染狀態(tài)。
（2）需要特定儀器。
（3）采樣儀器本身也可能是潛在的污染源。
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