細(xì)胞鋪板時如何鋪出合格的板子？
發(fā)布時間：2022-07-28 瀏覽次數(shù)：3887
做貼壁細(xì)胞的實驗，經(jīng)常需要做細(xì)胞鋪板。細(xì)胞鋪板的好壞決定了后續(xù)實驗的成敗，這個實驗看似簡單，其實也不是那么好做，其中關(guān)鍵是要鋪得均勻鋪得平整，其中的操作蘊含著豐富技巧。
（圖）細(xì)胞不均勻鋪板 |
（圖）細(xì)胞均勻鋪板 |
要鋪出一個好的板子，必須要做到一下幾點：
1、單細(xì)胞重懸
貼壁細(xì)胞培養(yǎng)完成后需要將細(xì)胞消化收集，并獲得單細(xì)胞懸液，但這時候即便消化下來也會連在一起了。這時我們需要注意：消化細(xì)胞需要選擇適用的消化液、適當(dāng)?shù)南瘻囟群蜁r間；消化后需要輕輕拍打細(xì)胞貼壁面，震落細(xì)胞；少量培養(yǎng)基重懸，并用移液器反復(fù)吹散細(xì)胞。做到這幾點后獲得細(xì)胞懸液基本是單細(xì)胞懸液。
2、一步完成
獲得細(xì)胞懸液后要先根據(jù)選擇的培養(yǎng)板的種類，以及要種的細(xì)胞密度調(diào)整細(xì)胞懸液的濃度，可在離心管中調(diào)整后反復(fù)顛倒搖勻，種板需要一步完成，切不可先加細(xì)胞后補液或先加液再補細(xì)胞。
3、十字搖勻
細(xì)胞種板后將懸液鋪滿整個底面，為防止來回走動導(dǎo)致細(xì)胞局部不均勻，放置細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)做十字搖勻，搖勻后就不能再移動，直到細(xì)胞貼壁方可。
以下為一般培養(yǎng)時不同載體的推薦使用方法
總結(jié)：細(xì)胞鋪板需要做到細(xì)胞均勻分布，密度適中。正確的鋪板需要獲得單細(xì)胞懸液，正確地調(diào)整密度，一步到位種植到培養(yǎng)板，通過十字搖法使細(xì)胞均勻分布。
