無血清細胞培養(yǎng)基的秘密
發(fā)布時間：2022-05-10 瀏覽次數(shù)：2108
細胞培養(yǎng)技術(shù)在生命科學(xué)研究領(lǐng)域是不可或缺的。在科研上，細胞培養(yǎng)基（medium）一般都會加入血清（Serum）來補充蛋白質(zhì)（protein）、生長因子（growth factor）或其他營養(yǎng)物質(zhì)（nutrients）等，大部分細胞培養(yǎng)會選擇使用胎牛血清（fetal bovine serum, FBS）。近年來也陸續(xù)有多樣的血清種類，例如：人類血小板生長因子（platelet-rich plasma, PRP）、小牛血清（bovine growth serum, BGS ）等，環(huán)凱集團供應(yīng) 的 胎牛血清 (FBS) 可用于敏感細胞系培養(yǎng)、細胞學(xué)驗證、抗體藥物開發(fā)、小鼠胚胎干細胞培養(yǎng)、雜交瘤細胞培養(yǎng)、昆蟲細胞培養(yǎng)、病毒包裝等，其細胞增殖檢査克隆率均≥90%。
為什么要發(fā)展無血清培養(yǎng)基？
顧名思義，無血清培養(yǎng)基（serum-free medium, SFM）系指不含任何血清成分的合成培養(yǎng)基。近年來，因為細胞治療（cell therapy）的快速發(fā)展與生物工業(yè)上的制備抗體、病毒抗原或是重組蛋白表達時，細胞培養(yǎng)基中的血清成分復(fù)雜，可能會影響制程或是增加不穩(wěn)定的因素，因此，無血清培養(yǎng)基成為其目標(biāo)，現(xiàn)今已有許多成熟的產(chǎn)品可供應(yīng)研究人員做選擇。
血清培養(yǎng)基的缺點
血清是一種成分極為復(fù)雜的混合物，為細胞培養(yǎng)增添了許多不可控制的變因。含有血清的培養(yǎng)基缺點如下：
(1) 價格昂貴，血清的費用約占細胞培養(yǎng)費用的50-60%。
(2) 血清可能會帶有污染源，F(xiàn)BS最常見的即為支原體或黑膠蟲污染。
(3) 血清中復(fù)雜的成分會使疫苗、細胞因子、單克隆抗體等的分離或純化帶來很大的困擾。
無血清培養(yǎng)基的優(yōu)點
? 避免血清批次間的差異，提高細胞培養(yǎng)的可重復(fù)性。
? 避免血清自身的污染源污染。
? 避免血清成分影響研究結(jié)果或是產(chǎn)品制程。
? 提高產(chǎn)品表達水平并易于純化。
無血清培養(yǎng)基的秘密
無血清培養(yǎng)基（SFM）的主要成分為基礎(chǔ)培養(yǎng)基和添加物，每家廠商的無血清培養(yǎng)基的基礎(chǔ)成分其實大同小異，重要的是其中的添加的黏附因子與生長因子等。其主要成分為下列幾種：
黏附因子：約有80%的細胞是屬于貼附型生長。一般的細胞培養(yǎng)基是利用血清作為其來源，在無血清培養(yǎng)基中，細胞黏附因子就是很重要的物質(zhì)，一般多為細胞外基質(zhì)（Extracellular Matrix）的組成分，例如：laminin、collagen、fibronectin等，這些成分可以幫助細胞貼附并維持細胞生長型態(tài)。
生長因子：生長因子是維持細胞活性與促進細胞增生、遷移、分化等，不可或缺的要素。
酶抑制劑：貼附型細胞一般多以胰蛋白酶（trypsin）進行繼代。在一般細胞培養(yǎng)中，F(xiàn)BS就含有抑制trypsin的成分，當(dāng)加入新鮮含有FBS的medium時便會終止trypsin的反應(yīng)，所以無血清培養(yǎng)基必須添加trypsin抑制劑。
