GB4789.2修訂一大亮點：增加測試片方法的并行準入
發(fā)布時間：2022-04-25 瀏覽次數(shù)：2357
文章來源：六扇門公眾號
菌落總數(shù)作為食品衛(wèi)生指示菌的重要指標，在食品安全檢測中的地位尤其重要，是涉及的食品種類較多的一項指標，小六特地去查詢了一下，截至2020年的數(shù)據(jù)，我國的產(chǎn)品標準中約有38類（種）食品規(guī)定了菌落總數(shù)限量要求。其中，36類（種）食品采用三級采樣方案，即n=5，檢測量也是非常大的。而且在食品加工環(huán)境、過程及原材料衛(wèi)生監(jiān)控中，菌落總數(shù)是以“檢測頻率高，檢測量大”著稱的一個重要指標。
GB 4789.2-2016版的方法是傳統(tǒng)平板法，操作比較復雜, 前期準備和后期清洗消毒工作量大, 在檢測任務大和檢測批次較多時, 容易出現(xiàn)交叉污染、檢測結果準確性降低、檢測效率不高等問題。
隨著食品工業(yè)的發(fā)展，人們對自動化、簡單、精準且環(huán)保的方法要求越來越高，所以，此次GB4789.2標準修訂的一大亮點是增加了測試片方法的并行準入。
GB4789.2新標準到底啥時候發(fā)布呀？
近期，許多小伙伴都在問GB4789.2新標準啥時候發(fā)布啊？都挺著急呀！
據(jù)說，標準目前在“排隊”等待發(fā)布了！
小六建議/呼吁：
1、標準的使用者，如食品企業(yè)、第三方、監(jiān)管機構等可以提前提前開展對市場上的測試片開展考察工作，作為技術儲備
2、測試片供應商，把控好產(chǎn)品質(zhì)量，擴展產(chǎn)品的適用范圍，對產(chǎn)品進行評價驗證，準備充足的庫存、開展產(chǎn)品推廣活動等，以提高市場競爭力。
3、第三方檢測機構可以準備開發(fā)測試片驗收業(yè)務了，參照GB4789.28提供產(chǎn)品驗收服務。
4、在此，也呼吁標準審核部門可以加快標準的發(fā)布，盡快幫助實驗室工作者提高工作效率。
測試片法介紹
01、方法原理及操作
測試片主要由培養(yǎng)基、冷水可凝膠、顯色劑組成，菌落總數(shù)大多數(shù)用的顯色劑是TTC。細菌在測試片上生長時，細胞代謝產(chǎn)物與濃度極低的指示劑TTC發(fā)生氧化還原反應，將指示劑還原成紅色產(chǎn)物，從而使細菌著色。所以，大多數(shù)測試片上紅色菌落判斷為菌落總數(shù)。
操作流程：在無菌條件下，吸取1mL待檢樣品滴加到測試紙片中, 覆蓋好紙片放置 36 °C±1 °C培養(yǎng) 48 h±2h（有快速測試片為24h±2h）。
計數(shù)全部紅色菌落為菌落總數(shù)（但也有雙顯色劑的測試片）。
02、適用范圍
由于操作簡單，被廣泛使用于加工過程菌落總數(shù)快速測定。適用于大部分食品及環(huán)境涂抹樣本，試用范圍較廣泛。
顏色較深樣品可能會有干擾，部分辛辣調(diào)味料會有干擾抑制，可選用特殊的樣品處理方式，如選擇合適的稀釋倍數(shù)或帶濾網(wǎng)的均質(zhì)袋進行樣品處理，具體依據(jù)各廠家的技術聲明來執(zhí)行。
03、主要方法特點
操作簡單，節(jié)省人工。減少了培養(yǎng)基準備工作, 節(jié)省了大量的人力物力。
平板菌落結果一致性好，避免了熱損傷菌落蔓延發(fā)生減少。
判讀更清晰，易與食品顆粒分開。
節(jié)省培養(yǎng)空間。檢測同樣數(shù)量的樣品，使用測試片所占的空間比平板要少很多，大大節(jié)省培養(yǎng)空間。
安全性高，不易碎、不會對人員造成潛在的傷害，另密封比較好，不容易直接接觸菌落。
04、常見問題
（1）出現(xiàn)菌落蔓延、水化現(xiàn)象
主要由食品中的芽孢桿菌引起的易產(chǎn)生液化的產(chǎn)品:冰淇淋、糕點、加工肉制品、調(diào)味料等?？梢詼p少堆疊數(shù)量或者進一步稀釋來緩解。
（2）TTC具有一定抑菌功能，測試片以TTC為指示劑是否有影響？
首先，測試片生產(chǎn)時添加的是極低濃度的TTC，低濃度的TTC對多數(shù)常見微生物是不造成抑制的；其次，多數(shù)測試片的工藝采取的是分層涂布，TTC位于最上層，菌體長出來后才能接觸到低濃度TTC。
（3）有些樣品，低稀釋度菌不生長，高稀釋度菌生長，如含有防腐劑、抑菌劑等具有一定抑制作用的樣本；含有乳酸菌較多的樣本；pH值較低的樣本。
可以通過稀釋梯度來解決。
（4）開封后測試片的保存方法及原因？
密封夾密封后，常溫/冷藏、避光、干燥保存，并于1個月內(nèi)使用完。如果從冰箱中取出后要常溫放置一段時間再打開使用以防止冷凝水的產(chǎn)生。
（5）測試片是否容易導致污染？
首先，測試片是預制的無菌培養(yǎng)基系統(tǒng)；其次，測試片的接種操作時間短，只要遵循無菌操作，其污染的幾率相對傳統(tǒng)方法更小；且培養(yǎng)過程中，測試片的接種生長區(qū)域處于密封狀態(tài)，不會導致污染。
注：環(huán)凱研發(fā)生產(chǎn)的 HANDY PLATE系列 微生物檢測片，可用于用于食品、飲料等微生物檢測，涵蓋生產(chǎn)原料、終產(chǎn)品和生產(chǎn)環(huán)境中衛(wèi)生指示菌（菌落總數(shù)、霉菌酵母菌計數(shù)）和致病菌（沙門氏菌、金黃色葡萄球、李斯特氏菌等）檢測。
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