如何更加準(zhǔn)確的測(cè)定培養(yǎng)基的pH值？
發(fā)布時(shí)間：2019-08-30 瀏覽次數(shù)：7892
大多數(shù)的培養(yǎng)基的配方都是依據(jù)標(biāo)準(zhǔn)來(lái)做的，例如國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)、藥典或者其他的國(guó)外標(biāo)準(zhǔn)。這些標(biāo)準(zhǔn)對(duì)培養(yǎng)基的pH值都有嚴(yán)格要求，一般都是控制在一個(gè)很小的范圍。所以pH值對(duì)于培養(yǎng)基廠家的質(zhì)量控制以及客戶(hù)對(duì)培養(yǎng)基的驗(yàn)收，都是很重要的。
校準(zhǔn)
首先在測(cè)量pH值時(shí)，我們都會(huì)對(duì)pH計(jì)進(jìn)行一個(gè)校準(zhǔn)工作，它的校準(zhǔn)準(zhǔn)確率對(duì)后續(xù)的測(cè)量有很大影響。pH電極需要有規(guī)律的進(jìn)行校準(zhǔn)。每天至少校準(zhǔn)一次，是最恰當(dāng)?shù)摹?/p>
由于每支電極都有其特征性的零點(diǎn)和斜率，為了得到可靠和精確的結(jié)果，最少兩點(diǎn)校準(zhǔn)是必不可少的。當(dāng)要測(cè)量大范圍的pH值時(shí)，則需要進(jìn)行至少3點(diǎn)校準(zhǔn)。大多數(shù)的pH儀表可以進(jìn)行3-5點(diǎn)校準(zhǔn)。
同時(shí)所測(cè)量的樣品pH值落在所選擇標(biāo)準(zhǔn)液范圍之內(nèi)也是非常重要的。
在電極進(jìn)行校準(zhǔn)時(shí)，最好等待緩沖液溫度在標(biāo)示溫度下校準(zhǔn)，這樣測(cè)出的pH值才是緩沖液標(biāo)示的值，比如pH 6.86和pH9.12的緩沖液是表示25℃下的pH值，那么你在20℃進(jìn)行校準(zhǔn)，顯示的就不是6.86或者9.12。不過(guò)一般廠家都會(huì)附送一張緩沖液在不同溫度下測(cè)的pH值，下圖可以參考下。
標(biāo)準(zhǔn)pH計(jì)緩沖溶液對(duì)照表
用于校準(zhǔn)的緩沖液是非常精確的溶液，擁有固定的數(shù)值和精度。緩沖液瓶開(kāi)封后，為了保證校準(zhǔn)的準(zhǔn)確性，要注意下面事項(xiàng)：
1. 第一次使用緩沖液時(shí)，在包裝上標(biāo)明日期，保證緩沖液包裝的密封性。
2. 不要把使用過(guò)的緩沖液倒回原瓶，或把不同廠家的緩沖液混合在一起。
3. 常溫下儲(chǔ)存緩沖液，儲(chǔ)存時(shí)避免陽(yáng)光直射
4. 校準(zhǔn)前請(qǐng)清洗電極，不要在原瓶中直接校準(zhǔn)
5. 絕對(duì)不要使用過(guò)期的或污染的緩沖液
6. 緩沖液到期應(yīng)及時(shí)更換新的緩沖液
培養(yǎng)基pH值的測(cè)量
培養(yǎng)基按形態(tài)可以分為固體培養(yǎng)基和液體培養(yǎng)基。液體培養(yǎng)基可以選擇普通液體的pH電極，固體培養(yǎng)基選擇對(duì)應(yīng)的固體pH電極，比如針對(duì)凝膠表面的平頭電極。如果固體培養(yǎng)基用液體的pH電極測(cè)量，得出的結(jié)果是沒(méi)有參考價(jià)值的。
首先在配置培養(yǎng)基的過(guò)程中，一定要注意配制用水一般用蒸餾水或者去離子水。否則可能對(duì)之后的pH值有影響。
其次，按照培養(yǎng)基廠家使用說(shuō)明配置滅菌。一般培養(yǎng)基外包裝標(biāo)簽上的pH標(biāo)識(shí)表示滅菌后25℃測(cè)的pH值，所以液體培養(yǎng)基要待溶液溫度達(dá)到25℃時(shí)測(cè)量培養(yǎng)基的pH值，固體培養(yǎng)基等其凝固后再用專(zhuān)用的固體pH電極測(cè)量，同時(shí)測(cè)量的溫度也要在25度。
這里有些人可能會(huì)說(shuō)我們的pH計(jì)有自動(dòng)溫補(bǔ)功能，是不是可以不用等到25度就可以測(cè)量？
這里需要注意的是自動(dòng)溫補(bǔ)功能只能補(bǔ)償電極本身，并不能補(bǔ)充待測(cè)溶液的溫度，所以培養(yǎng)基標(biāo)準(zhǔn)要求在25℃測(cè)量，那待測(cè)培養(yǎng)基溶液溫度就要控制在25℃左右再測(cè)。
維護(hù)
每次測(cè)量后用去離子水沖洗電極，切勿用紙擦拭電極。紙張粗糙的表面會(huì)刮劃并損壞pH敏感玻璃上的凝膠層，并且會(huì)在電極上產(chǎn)生靜電電荷。靜電電荷會(huì)導(dǎo)致測(cè)量信號(hào)非常不穩(wěn)定。
測(cè)量間隙或電極短時(shí)不用，電極需要儲(chǔ)存在盛有專(zhuān)用的電極儲(chǔ)存液，或電解液(如：3mol/L KCl)或緩沖液pH4或pH7的容器中。確保容器中電解液液面低于電極中填充液的液面。
